طرز تهیه محیط کشت بلاد آگار

طرز تهیه محیط کشت بلاد آگار

28 گرم پودر آگار مغذی را در یک لیتر آب مقطر مخلوط میکنیم
به مخلوط حرارت داده تا به طور کامل اجزا حل بشن
ترکیب بدست اومده رو در دمای 121 درجه سانتی گراد به مدت 15 دقیقه اتوکلاو میکنیم
سپس اجازه میدیم آگار مغذی خنک بشه
وقتی که به دمای 45 الی 50 درجه سانتی گراد رسید، 5 درصد وزنی خون استریل شده و گرم شده تا دمای اتاق به مخلوط اضافه و به خوبی میکس بشن
مراقب باشین ک حباب هوا تولید نشه
در نهایت، محیط کشت بلاد آگار را به صفحات استریل منتقل کنید . حباب رو با شعله بترکونید
یعنی اون چراغ شعله رو برعکس کنید بگیرید سمت محیط کشت.

طرز تهیه محیط کشت بلاد اگار به بیان دیگر

1. پودر به ازای ی لیتر درست میکنن ولی هر چقدر که میخواین تناسب بزنین(به ازای ی لیتر زده روش چن گرم آگار مبخواین)
2. پودر وزن میکنین بعد به ارلن ببرین با آب مقطر حجم برسونن
3. روی شعله بگیرین تا جوش بیاد یکم(شفاف بشه محلول یعنی اوکی)
4. استریل با اتوکلاو دما۱۲۱به ۴۰_۵۰برسونین
5. بعدش زیر آب سرد بگیرین تا به دما نرمال برسه(هر موقع که تونستین با دست بدون دستکش بگیرین یعنی اوکی)
6. 5درصد وزنی(یعنی مثلا وزن کردین شد ۲۵ باید ۵درصد۲۵خون اضافه کنین) خون گوسفندی اضافه
7. یخچال و فریز و تمام

(روی هر پلیت۲۰۰سی سی فقط بریزید)

استریل کردن لوپ

استریل لوپ راحته قسمت حلقه مانند لوپ روی شعله به حالت مایل نه افقی یا بالای شعله میگیریم،تا قرمز بشه،قرمز شدن یعنی خوب حرارت داده شده
بعدش ۲_۳دقیقه صبر میکنیم تا به دمای اتاق برسه بعدش میزنیم کلنی ( ابتدای یک سوم بالایی شعله )
(و اینکه اگه لوپ آلودس صبر کنیم تا باکتری ها هر چیزی که روشه کامل بسوزه)
⭕️برا کشت ادرار باید هم رو بلا اگار ببریم هم EMB ؟ بله روی هردو محیط کشت میبریم

طرز تهیه محیط کشت emb

36 گرم از محیط کشت ای ام بی اگار رو تو یک لیتر اب مقطر حل میکنیم سپس حرارت میدیم تا کاملا محیط کشت محلول بشه سپس تو دمای 121 درجه سانتی گراد به مدت 15دقیقه اتوکلاو می کنیم تا استریل بشه و در اخر تو دمای مناسب قرار میدیم تا سرد بشه و داخل پلیت های استریل پخش می کنیم.

چند نکته مهم درباره بلاد آگار

1-این محیط برای افتراق همولیتیک ها مناسبه

چون گلبول های قرمز کاملا به عبارتی همولیز نشده هستن و این برا تشخیص باکتری های همولیتیک خوبه
همولیز بتا: گروهA،استاف اورئوس
همولیز آلفا: گروهB,ویریدانس ها
همولیز گاما: خیلی ها هستن
همولیز بتا: کاملRBC لیز میشه هاله سفید و شفاف
همولیز آلفا: ناقص RBC لیز میشه(هاله سبز) میبینیم
همولیز گاما: RBC لیز نمیشه

2-هیچ وقت هیچ وقت برای تست کاتالاز از کلنی باکتری که توی این محیط کشت استفاده نکنین

چون کاذب میده جوابو چونRBCدارای انیدراز کربنیک وباعث تجزیهH2O2میشه از محیط های کشت مثه نوترینت آگار استفاده کنین

3-تو بلاد هم مثبت و هم منفی رشد میکنه

اما تو emb فقط گرم منفی رشد میکنه EMB برای انتروباکتریاسه ها گرم منفی . این محیط غنی شده است بلاد آگار تقریبا همه باکتری ها رشد میکنن.

⭕️بلادآگار: RBC لیز نشده است و این در تست همولیتیک کمک میکنه
⭕️شکلات آگار: RBC لیز شده هستن و این در تست همولیتیک بکار نمیاد

محیط کشت شکلات آگار

به دلیل اینکه شکلاتی رنگ هست به این نام گفته میشود و باکتری های غیر هوازی در آن رشد میکنند

شکلات آگار

• اگر بهش انتی بیوتیک هایی مثل ونکومایسین و نیستاتین اضافه بشه،بهش میگن تایر مارتین که محیط اختصاصی برای نایسریا هاست
• نیستاتین از رشد مخمر ها جلوگیری میکنه
• شکلات آگار محیط انتخابی محسوب میشه

بخوانید و بدانید [button type=”round” color=”red” target=”” link=”http://sabiolab.ir/blog/%d8%ae%d8%a7%d9%86%d9%88%d8%a7%d8%af%d9%87-%d8%a7%d8%b3%d8%aa%d8%a7%d9%81%db%8c%d9%84%d9%88%da%a9%d9%88%da%a9%d8%a7%d8%b3%d9%87/”]نگاه مقدماتی به خانواده استافیلوکوکاسه[/button]

لطفا سوالات و نظرات خود را در انتهای همین صفحه درج کنید.